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麻疹Measles IgM ELISA

时间:2011-3-24阅读:191
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用途

本试剂盒用于定性检测人血清中的Measles IgM抗体。

试剂盒组成储存于2-8°C)

酶标板      

96wells´2              

浓缩洗涤液(20X)          

60ml

样品稀释液  

60ml             

阴性对照

1 vial

显色液                  

30ml

终止液

30ml

校正液              

1 vial             

酶联物              

32ml

阳性对照

1 vial

吸收液

24ml

标本收集

1. 避免溶血、高血脂标本。

2. 标本中若有悬浮物,应离心去除。

3. 标本若不及时检测,请冻存于-20°C

准备工作

1. 取出所需板条,其余立即密封放回2-8°C。取出的板条应放入自封袋内(密封)平衡至室温再试验,以防水滴凝聚在冷板条上。

2. 浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(1200ml)。未用完的放回2-8°C

3. 试剂盒应平衡至室温再试验。所有的操作在质控酶标板和抗原酶标板上同时进行。

4. 血清标本、质控品、校正液用样品稀释液作1:41稀释,即10ul校正液加入400ul 样品稀释液中(10ul 血清加入400ul样品稀释液中)。混匀。取150ul1:41稀释的血清标本加入150ul 吸收液,混匀。(取150ul1:41稀释的质控品/校正液 加入150ul 吸收液,混匀。)室温放置20分钟。zui终稀释1:81)

试验过程

试剂盒应平衡至室温再试验。所有的操作在质控酶标板和抗原酶标板上同时进行。

1. 加入100ul已稀释质控品至适当酶标板孔中。

2. 加入100ul已稀释校正液至适当酶标板孔中。

3. 加入100ul已稀释血清至适当酶标板孔中。

4. 空白孔内加入100ul样品稀释液,轻轻混匀30秒钟,封住板孔,室温20分钟。

5. 洗板:甩尽孔内液体,每孔加入洗涤液250-300ul,静止30秒后甩尽液体,在厚叠吸水纸上拍干,洗5次。

6. 每孔加入100ul 酶联物轻轻混匀30秒钟,封住板孔,室温20分钟。

7. 洗板:甩尽孔内液体,每孔加入洗涤液250-300ul,静止30秒后甩尽液体,在厚叠吸水纸上拍干,洗5次。

8. 每孔加入显色液100ul;室温10分钟。

9. 每孔加入终止液100ul,混匀,5分钟后60分钟内在450nm处读取OD值。

结果判断

1. 质控品和样品的OD值应减去空白孔的OD值。

2. 抗原酶标板上的OD值应扣除质控酶标板上的OD值,取差值。

3. Cutoff=校正液Calibrator的OD值´CF(CF标于Calibrator上)

4. Index=样品OD/Cutoff

5. Index³1.10为阳性;Index0.91-1.09间为可疑;Index£ 0.90为阴性。

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