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免疫荧光组织染色以其步骤简便,多重标记等优点,逐渐取代免疫组织化学染色方法成为实验室zui常用的形态学检测手段。为了避免荧光标记发生淬灭,要求实验操作在暗弱的光线下进行,增加了操作的难度,加大了实验的工作量。 就贴片方法来说,在暗弱光线下的免疫荧光目前还是沿用在光亮条件下免疫组化的用毛笔或者*将切片一个一个地挑到载玻片上,耗时长,切片不容易看清,特别是遇到像背根神经节(DRG)这样的小切片。
方法改进:
简便的方法是用口径加大管口抛光的吸管一次性吸取数张切片,将其连同缓冲液滴在载玻片上,然后用吸管使缓冲液扩散至整个玻片,切片也就相应的散在分布在玻片上,接下来用吸管将大部分的缓冲液吸走,然后用毛笔进一步去除水份,然后垂直玻片,剩余的水份就会流下来,zui后用吸水纸将其吸走,期间用毛笔防止切片滑下来,贴片完成,晾干即可封片观察。
结果:
本方法一次可贴数张切片,切片与器械接触少,zui大限度避免对切片造成损伤,减少暗弱光线的不利影响,节省时间,减轻工作量,使荧光染色不再是伤害眼睛的工作。
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