小鼠生长激素ELISA试剂盒检测相关表达和对免疫的影响

小鼠生长激素（GH）ELISA试剂盒检测生长激素缺乏症相关表达和对免疫的影响

生长激素缺乏症(GHD)是指生长激素分泌功能障碍所致的生长迟缓,是一种严重影响儿童青少年身心健康的疾病.据报道患病率大约是1/4000~1/15000.GHD的病因可划分为特发性和器质性两种.随着内分泌诊断技术和影像学检查技术的高速发展,对GHD病因的认识也逐渐发生了变化,主要提出了两种假说,即所谓"损伤学说"和"发育异常学说".该研究的目的在于分析GHD的病因谱,分析这些病因对下丘脑垂体结构的影响作用以及与临床表现的关系,分析基因异常在GHD发病机制中的作用.GHD的病因多种多样,具有一定的异质性.除少数是有明确的器质性中枢神经系统病变外,绝大多数为特发性.特发性GHD中,围产期异常是重要的致下丘脑垂体损伤的原因,但不能除外其它因素的作用,如胚胎发育过程中的异常等.围产期异常可能是通过造成垂体柄断裂来影响垂体的多种内分泌功能.在特发性的GHD中,极少数病例是由于GH-N基因异常而造成的.因此对于GHD的病因的研究有待于进一步的深入,特别是对于下丘脑垂体的胚胎发育的调控基因/因子,如Pit-1转录因子等进行研究.

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人生长激素(human growth hormone,hGH)基因在小鼠体内的表达和持续时间以及表达的生长激素对小鼠血清中IL-2、IFN-γ和TNF-α浓度的影响.方法 1.构建真核细胞高表达hGH基因的重组质粒pcDNA3-hGH,并对所构建的重组质粒进行内切酶图谱鉴定和序列分析.2.通过脂质体介导将含hGH的重组质粒pcDNA3-hGH转染入COS-1细胞中,通过免疫组化和ELISA的方法对COS-1细胞和培养上清中的hGH进行了观察,并用Jurkat细胞增殖法检测重组质粒表达蛋白的生物学活性.3.将重组质粒pcDNA3-hGH直接注射于小鼠股四头肌中,于注射后第5、15、25、40、60天从眼眶取血,分离血清,用ELISA方法检测血清中GH、IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平;同时取注射处的骨骼肌组织进行免疫组化染色以鉴定hGH的表达.