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大鼠α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）ELISA试剂盒操作步骤

时间：2011/3/9阅读：605
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                        大鼠α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）ELISA试剂盒操作步骤

检测范围：                                                                                             96T
2.5ng/ml-80ng/ml
 
使用目的：
大鼠α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）ELISA试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）含量。
操作步骤
1.         标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

80ng/ml
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
40ng/ml
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
20ng/ml
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
10ng/ml
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
5ng/ml
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 
 
2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
4.         配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.         温育：操作同3。
8.         洗涤：操作同5。
9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
保存条件及有效期
2．有效期：6个月

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