小鼠肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒使用说明

               小鼠肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒使用说明

【产品用途】：被测样品定性定量分析

【产品规格】：96T/48T（两种规格）

【检测方法】：酶免法/酶联免疫法（ELISA）

【保存条件】：2-8℃

【供 货 期】：1-3天（现货供应）

【产品性状】：液体盒装

检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法,保存条件:2-8℃,公司提供代测服务，。

检测范围：                                                          96T

3pg/ml-160pg/ml

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

试剂盒组成

原理
本实验采用ABC-HRP方法。用抗大鼠IFN-r单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IFN-r与单抗结合，高灵敏检测样品中IFN-r的含量。 

准备试剂与收集血样

1. 洗涤液：用重蒸水1:25稀释

2. 收集血液标本：采集血清尽早检测，2-8oC保存一天；需更长时间须冷冻（-20 oC）保存，避免反复冻融。

检测程序

1. 建立标准曲线：设标准孔8孔，每孔中各加入样品稀释液100ul，*孔加标准品100ul，混匀后用加样器吸出100ul，移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔，zui后，从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照，第八孔为零孔。

2. 加样：待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。

3. 将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 oC 120分钟。

4. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。

5. 每孔（除零孔）加*抗体工作液50ul，置37℃ 60分钟。

6. 洗板：同前。

7. 每孔（除零孔）加酶标抗体工作液100ul（两滴），将反应板置37 oC 60分钟。

8. 洗板：同前。

9. 每孔加入底物液A、B各一滴，置37 oC避光反应15分钟。

10. 每孔加入1滴终止液混匀。

11. 在450nm处测吸光值。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除零孔值后再行计算。

2. 以标准品500、250、125、62.5、31.3、15.6、0 pg/ml之OD值在双对数纸上作图，画出标准曲线。通过标本的OD值可以在标准曲线上查出其浓度。或使用计算机软件，绘制出标准曲线，计算样品含量。

注意事项

1. 以上标准孔及待查样品均建议做复孔，每次测定应同时制作标准曲线。

2. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。有效期6个月。

3. 本试剂盒取出的试剂在室温条件下使用，溶液应轻轻摇匀后使用。

4. 本试剂盒含2M硫酸，不要将它与含*的废物混在一起。

5. 板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。

6. 本试剂盒仅供研究用。