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氨基转移反应的定性鉴定操作方法

时间:2013/4/18阅读:479
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氨基转移反应的定性鉴定操作方法:
将兔击晕,迅速解剖,取出肝脏,在低温条件下剪碎。称取匀浆后,离心取上清液,即为制备的酶液。体外氨基移换反应。纸上层析法检查每人4个点(标准*溶液、标准*溶液、对照上清液、样品上清液)。点样放入层析罩内。用被酚所饱和的水溶液,平衡后,用带小漏斗的玻璃管从层析罩上加饱合酚试剂25ml于层析缸内。然后,立即盖紧塞子,当溶剂前沿达到距滤纸上端约2.5cm处,取出滤纸,晾干或吹干,以除去酚溶剂,喷洒0.1%茚三酮乙醇溶液,放入烘箱中显色氨基酸与茚三酮反应,在滤纸上呈现紫红色斑点。

关键步骤与注意事项
① 取动物新鲜组织制备酶液,防止酶失活。
② 加碘乙酸抑制酶解作用。

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