免疫组化一抗选择要点和技巧

 免疫组化一抗选择要点和技巧

要点：一抗二抗都是一种可以特异结合别的东西的基团，而且一抗可以至少结合两种其他基团（底物和二抗）。  

一抗尽量选择单克隆抗体，还要注意其抗体来源（兔抗、鼠抗或者其他）要与二抗匹配。至于进口还是国产我觉得要看是什么组织，当然大多数情况下还是进口的好一点，也可以咨询本公司业务员：电　　话：/60520498

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抗体选择首先考虑你需要染得的组织或细胞的来源，其次考虑在染色中需要不需要抗体双标，明确了这一点后，就可以考虑你所需要的抗体的来源。在购买抗体的时候，如果你需要标记的蛋白是比较稳定、表达量比较高或者说是已经非常常用的蛋白，那么可以考虑国产的抗体，如中杉或者博士德。如果是比较新的蛋白，或者是不太清楚的蛋白表达量的，建议你用进口的抗体，如abcam、cell signal、sata等，进口的抗体中sata的抗体比较便宜，但是用过后老是觉得抗体效价一般。

相关抗体反应规律：

（1）初次反应产生抗体：当抗原*次进入机体时，需经一定的潜伏期才能产生抗体，且抗体产生的量也不多，在体内维持的时间也较短。 　　

（2）再次反应产生抗体：当相同抗原第二次进入机体后，开始时，由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合，可使原有抗体量略为降低。随后，抗体效价迅速大量增加，可比初次反应产生的多几倍到几十倍，在体内留存的时间亦较长。 　　

（3）回忆反应产生抗体：由抗原刺激机体产生的抗体，经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原，可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同，则称为特异性回忆反应；若与初次反应不同，则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的，短时间内即很快下降。

多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：

1、制备抗原。 　

2、选择实验动物。

3、动物免疫。 　

4、试取血进行测试，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。

6、纯化出抗体。 　

7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。