免疫PCR体系的组成分析

免疫PCR体系的组成
免疫PCR体系由待检抗原，特异性抗体，连接分子，DNA和PCR扩增系统。以下为上海劲马为大家提供的免疫PCR体系有哪些重要组成。咨询。
1．待检抗原  被检测的样品可以是抗原，或者是作为抗原的某种抗体。待检的抗原可以直接吸附于固相(包被抗原)，这一过程与ELISA试验是相同的。
2．特异抗体  免疫PCR中的特异性是对应于待测抗原，与ELISA一样，抗体的特异性和亲和力将影响免疫PCR的特异性和敏感性。一般均选用单克隆抗体，这个抗体常采用*标记，通过亲和或叶绿素再结合DNA。
3．连接分子  连接分子是连接特异抗体与DNA之间的分子。Sano等用链亲和素/蛋白A(striptavidin-protein A)基因工程融合体作为连接分子来连接*标记的DNA与抗体，此种融合蛋白的链亲和素部分可识别DNA上的*，蛋白部分可识别抗体的Fc段。
4．DNA和PCR系统   免疫PCR中的DNA是一指示分子，用DNA聚合酶将结合于固相上的DNA特异放大，由此定量检测抗原。免疫PCR的敏感性多于ELISA主要是应用了PCR强大的扩增能力。免疫PCR中的DNA分子可以选择任何DNA，但要保证DNA的纯度，且有较好的均质性，尽可能不选用受检样品中可能存在的DNA。一般可选用质粒DNA或PCR产物等。DNA的*化是用*标记的dATP或dUTP通过聚合酶标记在DNA分子上，一般是1个分子DNA标记2个*，标记率可达。免疫PCR的PCR扩增系统与一般PCR一样，主要包括引物、缓冲液和耐热DNA聚合酶。