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选择杂交瘤细胞及抗体检测

时间：2012/9/15阅读：564
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1．HAT选择杂交瘤细胞  脾细胞和骨髓瘤细胞经PEG处理后形成多种细胞的混合体，只有脾细胞与骨髓细胞形成的杂交瘤细胞才有意义。在HAT选择培养液中培养时，由于骨髓瘤细胞缺乏胸苷激酶或次黄嘌呤*核糖转移酶，故不能生长繁殖，而杂交瘤细胞含有上述两种酶，在HAT选择培养液中可以生长繁殖。用HAT选择培养1～2d内将有大量瘤细胞死亡，3—4d后瘤细胞消失，杂交细胞形成小集落。HAT选择培养液维持7一tod后应换用HT培养液，再维持2周，改用一般培养液。在上述选择培养期间，杂交瘤细胞布满孔底l／10面积时，即可开始检测特异性抗体，筛选出需要的杂交瘤细胞系。在选择培养期间，一般每2～3d更换一半的培养液。

 
    2．抗体的检测  检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同选择不同的筛选方法，一般以快速、简便、特异、敏感为原则。常用的方法有以下4种。
    （1）RIA可用于可溶性抗原、细胞McAb的检测。
    （2）ELISA可用于可溶性抗原、细胞和病毒等McAb的检测。
    （3）免疫荧光试验适合于细胞表面抗原的McAb的检测。
    （4）其他如IHA、细胞毒性试验等。

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