上海劲马实验设备有限公司
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豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒详细说明有96T/48T包装规格，价格实惠，质量稳定，欢迎新老客户来电来涵。
豚鼠血清一氧化氮（NO）ELISA试剂盒详细介绍
豚鼠血清一氧化氮（NO）ELISA试剂盒检测方法：酶联免疫法/酶免法（ELISA）
产品用途：科研ELISA检测试剂盒.本公司可提供实验代测服务.
检测原理： 采用双抗体夹心ABC-ELISA法
产品种属齐全有：人，小鼠，大鼠，豚鼠，猪，犬，兔，牛，羊，猴，兔，马等动物种属。
待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。
保存条件：2-8℃
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联 系 人：王
服务承诺：工作时间内免费的技术咨询和指导,为客户提供来样检测服务，zui大限度实验结果的有效性。
【注意事项】
1. 从-20℃取出的试剂盒，在4℃解冻过夜。盒内每一瓶解冻的溶液在开启瓶盖之前都要轻轻摇匀，避免解冻时出现的分层，否则会出现浓度不均一的现象。
2. 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
3. 配制各种试剂时，切记混匀！
4. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
5. 建议所有猪IL-1β标准品、样本都做双份检测。
6. 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活！
7. 为免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试管。
【洗板方法】
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将*的PBS或TBS洗涤缓冲液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
【样品的准备和保存】
样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存，且避免反复冻融。
血清——用干净试管收集血液，室温凝固2小时或4℃过夜，离心1000×g 10分钟，收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
细胞培养、组织匀浆、体液——离心去除沉淀，立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
【样品稀释的一般原则】
用户须查阅文献了解标本内待测因子的含量，决定适当的稀释倍数，以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的*检测范围。样品的稀释应有详细记录。
【试剂的准备和保存】
A. 猪IL-1β标准品的稀释和使用：在使用前2小时内准备。将冻干品管内加入1ml样品稀释液，*溶解后做倍比稀释。
稀释后的猪IL-1β标准品在2小时内使用。
B．*标记猪IL-1β抗体工作液：在使用前2小时内准备。
1． 根据每孔需要0.1ml计算总的用量（实际配制时应多配制0.1-0.2ml）。
2． 按10ul*标记猪IL-1β抗体加猪IL-1β抗体稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。
C．亲和素-过氧化物酶复合物（ABC）工作液的准备：在使用前1小时内准备。
1． 根据每孔需要0.1ml计算总的用量（实配时应多配制0.1-0.2ml）。
2． 按10ul亲和素-过氧化物酶复合物（ABC）加ABC稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。
D. TMB显色工作液的准备：在使用之前30分钟，按TMB显色液A 9份加 TMB显色液B 1份的比例配制TMB显色工作液。
【操作程序】
1． 确定本次检测所需的已包被猪IL-1β抗体的酶标板孔数目。
2． 将倍比稀释的猪IL-1β标准品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。
3． 酶标板加上盖，37℃反应90分钟。
4． 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。
5． 将准备好的*猪IL-1β抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。
6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次，每次浸泡1分钟左右。
7． 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。
8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次，每次浸泡1-2分钟左右。
9． 按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液，37℃避光反应，反应过程中，要经常的观察，当肉眼可见猪IL-1β标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔差别不明显时，即可加入TMB终止液0.1ml/孔。（显色反应zui长不要超过30分钟）。
10． 用酶标仪在450nm测定O.D.值。
11． 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍，其实际浓度应该×N。
【操作程序总结】：
准备试剂，样品和猪IL-1β标准品
加入准备好的样品和猪IL-1β标准品，37℃反应90分钟
洗板2次，加入*化猪IL-1β抗体工作液，37℃反应60分钟
洗板3次，加入ABC工作液，37℃反应30分钟
洗板5次，加入TMB显色液，37℃反应
加入TMB终止液
30分钟之内读OD值
计算标本待测因子含量
【检测范围】：1000pg/ml→15.6pg/ml。
【敏感性】： ＜5pg/ml
【特异性】： 系统和其它细胞因子无交叉反应。
【保存】： -20℃ [短期内（如两周）可4℃]
【有效期】： 12个月（-20℃）。
【用途】： 用于体外定量分析液体标本（通用型）。
豚鼠血清一氧化氮（NO）ELISA试剂盒上海恒远生物现货供应,购买立减500元,提供代测服务,产品范围: 人,小大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽,自身抗体 ,血栓与止血, 骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌,自身抗体科研ELISA检测试剂盒等。
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