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布氏琼脂250g/瓶用于弯曲菌、布鲁氏菌属分离
改良 CCDA 培养基,培养基批发250g/瓶用于弯曲菌选择性分离,每 100ml培养基,培养基批发中添加 1 支 20711
人小肠癌细胞系,HIC细胞 Bolton *,培养基批发250g/瓶用于弯曲菌选择性增菌,每 100ml培养基,培养基批发中添加 1 支 20710
Campy-Cefex 琼脂培养基,培养基批发250g/瓶每 200ml 培养基,培养基批发中添加 10ml 马血和 1 支 20716 ;若制备 改良 Campy-Cefex 琼脂,每 200ml 培养 基中添加 10ml 马血和 1 支 20718
ATCC细胞株的品质,人小肠癌细胞系,HIC细胞 国内细胞的价格。对于初做细胞培养研究的工作者来说,会经常出现细胞培养问题,公司在细胞培养问题方面做了些总结,希望对你们能有所帮助。
【人小肠癌细胞系,HIC细胞培养液pH值变化太快】CO2张力不对。培养瓶盖拧得太紧。NaHCO3缓冲系统缓冲力不足。培养液中盐浓度不正确。细菌、酵母或真菌污染。
按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度,2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。(2)改用不依赖CO2培养液,松开瓶盖1/4圈,加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度,在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hank’s盐配制的培养液,丢弃培养物或用抗生素除菌。
【培养液出现沉淀,但pH值不变】用洗涤剂清洗后残留磷酸盐将培养基成分沉淀下来。冰冻保存培养液,用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后除菌,将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。
【培养液出现沉淀,同时pH 发生变化】细菌或真菌污染,丢弃培养物或用抗生素除菌。
【培养细胞不贴壁】*消化过度;支原体污染;培养液中无贴壁因子,缩短*消化时间或降低*浓度,分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
【悬浮细胞成簇】培养液中含钙、镁离子。支原体污染。蛋白酶过度消化使得细胞裂解释放DNA,用无钙镁*洗涤细胞,轻轻吹吸细胞获得单细胞悬液,分离培养物,检测支原体。如发现支原体污染,丢弃培养物,用DNase I处理细胞。
【原代细胞培养物污染】原代培养组织在进入培养前已污染,培养前用含高浓度抗生素的*反复冲洗组织。
【培养细胞死亡】培养箱内无CO2。培养箱内温度波动太大。细胞冻存或复苏过程中损伤。培养液渗透压不正确。培养液种有毒代谢产物堆积;检测培养箱内CO2检查培养箱内温度;取新的保存细胞种;检测培养液渗透压。注意:大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260–350mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压,换入新鲜培养液。
【培养细胞生长减慢】由于更换不同培养液或血清。培养液中一些细胞生长必需成分如*或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。培养物中有少量细菌或真菌污染。试剂保存不当。
比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。
1)增加起始培养细胞浓度。
2)让细胞逐渐适应新培养液。
3)换入新鲜配制培养液。
4)补加*或生长因子。
5)用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物。或用抗生素除菌。
6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在2–8℃避光保存。含血清*培养液在2–8℃7)保存,并在2周内用完。
8)接种细胞起始浓度太低,细胞已老化,支原体污染。
9)增加接种细胞起始浓度。
10)换用新的保种细胞。
11)分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
庖肉培养基,培养基批发250g/瓶用于梭菌或其它厌氧菌的培养,需 添加适量 11002(GB、SN)
CW 琼脂基础(不含*)250g/瓶用于加热材料魏氏梭菌的检验,需 添加卵黄盐水悬液(21001)或脱 纤维血液(日本)
CW 琼脂基础(含*)250g/瓶用于加热材料魏氏梭菌的检验,需 添加卵黄盐水悬液(21001)或脱 纤维血液(日本)
Bolton 肉汤基础250g/瓶用于弯曲菌选择性增菌,每 100ml培养基,培养基批发中添加 1 支 20701
Skirrow 琼脂基础 250g/瓶用于弯曲菌选择性分离,每 100ml培养基,培养基批发中添加 20702、20703 各 1 支;若添加 1 支 20712 和 7%羊血 则组成改良 Skirrow 琼脂
改良 CCD 琼脂基础250g/瓶用于弯曲菌选择性分离,每 100ml培养基,培养基批发中添加 1 支 20702
布氏肉汤250g/瓶用于弯曲菌分离及动力试验
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