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冬天到了ELISA试剂盒也需要保温哦!

时间:2013/11/14阅读:482
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    以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。ELISA试剂盒37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度.
在建立ELISA试剂盒方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1~2小时,产物的天生可达。ELISA试剂盒湿盒应先放在保温箱中预温至划定的温度,特别是在气温较低的时候更应如斯。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA试剂盒中似不恰当。这就是为什么ELISA反应老是需要一定时间的温育。为加速反应,可进步反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。  
    温育常采用的温度有43℃、37℃、室温顺4℃等。室温温育时要平置于操纵台上即可。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。不管是水浴仍是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。
     保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜笼盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。ELISA试剂盒若用保温箱,应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,zui后将ELISA板放在湿纱布上。应留意温育的温度和时间应按划定力求正确。抗原抗体反应4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成zui多的沉淀。室温温育的反应,操纵时的室温应严格限制在划定的范围内,尺度室温温度是指20~25℃,但详细操纵时可根据仿单的要求控制温育。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如斯。为保证这一点,一个人操纵时,一次不宜多于两块板同时测定.。但因所需时间太长,一般不予采用。
 

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