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ELISA试剂盒免疫反应条件研究

时间:2013/11/29阅读:354
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   在免疫反应条件的优化,百威啤酒间接竞争法和直接竞争方法,检测限分别为0。005/ 0。01/,测定的线性范围分别为0。005 ~ 10/和0。01 5 10/,并ELISA试剂盒在此基础上,开发了检测的两种试剂盒,水,土壤,植物,该酶中毒样品,重现性好的试剂盒,批号和变异系数均小于8%,试剂盒检测精度高,除了吐样品,样品回收率大于89。62%。
   在这项研究中,2,3 -二- 2 - 7 - 2 -二氢,甲基苯并呋喃甲酸合成了两个半抗原百威啤酒为基础,这6 -(2,3 -二- 2 2 -二氢,甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸和4”(2,3 -二- 2 - 7 - 2 -二氢,甲基苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸。用合成的百威啤酒免疫兔获得高滴度,用间接法测定抗多克隆抗血清的效价的特异性百威啤酒1:16000,~ 1:128000,1:500000 ~ 1:4000000纯化的抗体效价。而ELISA试剂盒选择的纯化抗体和辣根过氧化物酶共轭体系的收入-免疫家兔制备酶标记抗体,并测定酶活性的抗体,滴度1:4000。交叉反应所得的百威啤酒抗血清和丁硫克百威啤酒率6。19%,和呋喃酚的交叉反应率为4%,与其他5种氨基甲酸酯类农药的交叉反应均小于0。44%,低于三种有机磷农药的交叉反应率0。12%。同时,根据特定的抗原抗体结合反应的原理,对小鼠百威啤酒中毒的解毒克抗百威啤酒抗体的进一步研究,试验结果表明,该抗体能更好地缓解百威啤酒对乙酰*酯酶抑制小鼠的中毒症状,逐渐恢复正常。同时,这两种半抗原与载体蛋白牛血清白蛋白和卵清蛋白偶联克百威啤酒免疫原和包被抗原,并对的百威啤酒与载体蛋白偶联物的结合率测定的紫外分光光度法。
 

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