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ELISA试剂盒包被用缓冲液及Z适包被抗原浓度的优化

时间:2014/1/3阅读:921
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     ELISA试剂盒包被缓冲液的优化
     包被抗原时,为了得到*的包被效果,我们采用了碳酸盐缓冲液(50mM ph9.6 )、磷酸盐缓冲液(50mM ph7.6)、以及TRIS盐酸缓冲液(50 mM ph7.6)三种缓冲液作为包被液,抗原包被浓度为5ug/ml,及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1:400及1:300,用自动酶标仪分析,选择*的包被缓冲液系统(表5)。同时为了保证缓冲液能够长期保存,我们在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作为防腐剂。
     ELISA试剂盒zui适抗原包被浓度的优化
     用优化好的包被缓冲液,将包被抗原(ALB)稀释成0.1ug/ml,1.0ug/ml,2.0ug/ml,4.0 ug/ml,6.0 ug/ml,8.0 ug/ml,10.0 ug/ml等六个浓度,包被微孔板,每孔100ul;竞争抗原浓度为4.0 ug/ml,2.0 ug/ml;酶标抗体稀释度为1:300,经孵育、显色、终止后用自动酶标仪分析(表6)。显色的强度在一定范围内与包被的抗原量成正比,但随着包被抗原浓度的增加,显色的强度反而降低,我们选择临界包被值作为包被抗原量。

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