过氧化氢检测试剂盒使用说明书

过氧化氢检测试剂盒使用说明：
1. 样品测定的准备：
    （1）细胞或组织样品的制备 
    对于培养的细胞，先收集细胞到离心管内，弃上清，按照每100万细胞加入100-200微升过氧化氢检测
    裂解液的比例加入裂解液，随后充分匀浆以破碎并裂解细胞。4℃约12000g离心3-5分钟，取上清，用
    于后续测定。组织样品按照每5-10mg组织加入100-200微升裂解液的比例进行匀浆。4℃约12000g离
    心3-5分钟，取上清用于后续测定。以上所有操作均需在4℃或冰上操作。制备好的细胞或组织样品如
    果不立即测定，可以-20℃冻存。
    （2）培养细胞上清液样品的制备 
    培养细胞的上清液可以直接用于后续的测定。 
    （3）血清、血浆或尿液样品的准备：
    配制50mM磷酸缓冲液，pH为6.0。用pH为6.0的50mM磷酸缓冲液把样品稀释50倍。例如4微升样品稀释
    到196微升pH为6.0的50mM磷酸缓冲液中。稀释后即可用于后续的测定。
2. 标准曲线测定的准备：
    样品在什么溶液中标准品也需用什么溶液稀释，这样可以减小误差。例如对于细胞样品，标准品宜用
    过氧化氢检测裂解液稀释，对于培养细胞的上清液样品，标准品宜用相应的细胞培养液稀释。标准溶
    液可以稀释成1、3、10、30、100微摩尔/升，或1、2、5、10、20、50、100微摩尔/升，初次测定后
    知道样品的浓度范围后可以对标准品在样品浓度范围附近密集测定。
3. 过氧化氢浓度的测定：
    （1）把过氧化氢检测试剂在冰上或冰水浴上融解。 
    （2）在检测孔或检测管内加入50微升样品或标准品。 
    （3）在每个孔内加入100微升过氧化氢检测试剂。 
    （4）轻轻振荡或敲打混匀，室温（15-30℃）放置30分钟。然后立即测定A560。如测A560有困难，波长
       可以选择540-570nm。
    （5）根据标准曲线计算出样品中过氧化氢的浓度。