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ELISA方法是一种特殊的试剂分析测试方法,具有灵敏度高和特异性强的两大特点:
1、灵敏度高 该测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实验实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或者微克、甚至纳克水平上进行定量。
2、特异性强 其特异性来自抗体或抗原的选择性,抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间,由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的zui终体积而异,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
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