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人乙型肝炎病毒前S2抗体ELISA试剂盒操作步骤

时间:2015/11/19阅读:1018
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昨日,上海复旦大学李老师向我司钱咨询了一个人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)ELISA试剂盒,在咨询的过程中,李老师问了一些关于人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)ELISA试剂盒的问题,其中就有问到那个操作步骤,我司钱为李老师讲解了,感谢李老师对我司的大力支持,下面是我司钱为李老师讲解的实验操作步骤:
人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。

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