沪鼎告诉您如何降低ELISA实验背景问题

    ELISA实验的原理似乎很简单，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，间中夹杂着洗涤和封闭。然而，即使是平淡无奇的洗涤和封闭，如果做得不太好，也有可能毁了整个实验。在实验结束时，我们是否能获得有意义的信息，这在很大程度上取决于结果的信噪比。
   

     背景噪音会影响您对结果的判断，沪鼎告诉您如何降低ELISA实验背景问题。
 

1.洗涤
    这一步骤看似很无聊，其实很重要，因为如果未结合的材料残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。
 

2.优化抗体浓度 
    如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景，为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。
 

3.封闭到底有多关键
    封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。如果背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。
   

    如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。