总结Hyclone胎牛血清的相关知识点

Hyclone胎牛血清使用方法：

　　在细胞培养过程中，经常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲，常使用的Hyclone澳洲胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱，影响后续实验的结果，我们在实验中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培养293T细胞，效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Hyclone FBS或者20%的Hyclone胎牛血清，要根据具体细胞选择合适的胎牛血清浓度。

HyClone胎牛血清保存方法：

(1)长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.

(2)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.

(3)血清解冻：瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

如何避免HyClone胎牛血清中产生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的产生：

(1)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

(2)血清分装冻存时，须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一。

(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

(4)勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏，从而影响血清的品质。

(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

(6)若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。