ELISA试剂盒样本的处理方案,不要错过哦！

ELISA 检测的目的是为实验提供准确可靠的定量分析实验依据。为了保证实验数据的可靠性，在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。在收集标本前都必须有一个完整的计划。ELISA样本的处理是elisa试剂盒实验关键的步骤！
标本类型：

ELISA 常见的标本一般包括：
◆ 液体类标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
◆ 培养细胞
◆ 组织标本
这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

标本的保存：

一般说来，在5天内测定的标本可放置于 4℃，超过一周测定的需低温冻存。
对收集后当天进行检测的标本，储存在 4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在 -20℃或 -70℃条件下保存。避免反复冻融。 
标本2-8℃ 可保存48小时，-20℃可保存1个月，-70℃可保存6个月。
部分标本也可加入适当防腐剂，激素类标本需添加抑肽酶。

样本的处理：

◆ 血清： 
室温血液自然凝固 10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 血浆： 
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10 ％（v/v）抗凝剂（0.1M 柠檬酸钠或1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2）混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 尿液、胸腹水、脑脊液： 
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◆ 细胞培养上清： 
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 
◆ 细胞： 
检测细胞的成份时，对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
通常裂解液接触细10秒后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞，离心收集细胞，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适量裂解液, 用枪吹打把细胞吹散。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
如果细胞量较多，必需分装然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续操作。
◆ 组织标本： 
切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS 或组织蛋白萃取试剂，缓冲液中可加入蛋白酶抑制剂。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于 -20度或 -70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。