目的就是为了研制人可溶性白细胞分化抗原28(sCD28)ELISA试剂盒的灵敏度、特异性和稳定性,并探讨其临床应用意义。方法取识别不同抗原位点的单抗8G8和2D5分别作为包被单抗和检测单抗,建立双单抗夹心-sCD28酶联免疫检测法(sCD28- ELISA),并绘制标准工作曲线。同时,测定36名健康人、23例系统性红斑狼疮(SLE)、38例类风湿性关节炎(RA)和62例Grave病患者血 清中sCD28含量。结果研制的sCD28试剂盒zui低检测下限为0.3ng/ml,具有良好线性关系的检测范围是0.5~16.0ng/ml;8G8单抗 包被测定板后置4℃冰箱保存180d,加入可溶性CD28-Ig重组蛋白的回收率在93%~109%之间。SLE、RA和Grave病患者血清中 sCD28含量分别为0.9~7.3ng/ml、0.3~6.8ng/ml、0.2~3.5ng/ml,明显高于健康人(0~1.1ng/ml,P <0.01)。结论自制的sCD28试剂盒,能准确测定样本中sCD28含量,可为sCD28分子基础研究和临床疾病辅助诊断、疗效评估及预后判断提供有价值的生物学参数,具有良好应用前景。
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