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温习下——沪鼎ELISA试剂盒特点

时间:2018-5-8阅读:691
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    ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技能之后发展起来的一种免疫酶技能。此项技能自70年代初面世以来,发展十分迅速,现在已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
     

    ELISA试剂盒ELISA原理——ELISA是以免疫学反应为根底,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技能。因为抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每参加一种试剂孵育后,可通过洗刷除去多余的游离反应物,然后确保试验成果的特异性与安稳性。在实践运用中,通过不同的规划,详细的办法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法,用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
 

ELISA试剂盒检测前准备作业
1. 请提早20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 将浓缩洗刷液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗刷液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶*溶解后再洗刷液。(加热温度不要超越50℃)运用时洗刷液应为室温。
3. 规范品: 参加规范品&标本稀释液1.0ml至冻干规范品中,静置10分钟,待其充沛溶解后,悄悄混匀(浓度为5000 pg/ml)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)。主张成以下浓度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如2500pg/ml规范品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述规范品参加含有0.5ml样品稀释液的EP管中,混匀即可,其他浓度以此类推。
4. 生物素化抗体作业液:试验前核算当次试验所需用量(以100μl/孔计),实践时应多100-200μl。运用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成作业浓度。当日运用。
5. 酶结合物作业液:试验前核算当次试验所需用量(以100μl/孔计),实践时应多 100-200μl。运用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成作业浓度。当日运用。

 

    ELISA试剂盒试剂特色——Elisa试验敏感性高,特异性强,重复性好,ELISA试剂安稳、易保存,操作简洁,成果判别较客观等因素。

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