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酶联免疫吸附实验于1971年由Engvall和Perlmann创建成功,成为继免疫荧光和放射免疫之后又一具有重大意义和深远影响的免疫技术。ELISA技术利用蛋白和聚苯乙烯表面疏水吸附的特性,将抗原-抗体特异性反应固定于固相载体表面进行,同时结合酶对底物的催化作用而产生高灵敏度的检测效果。
ELISA技术的实验基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。ELISA实验基本步骤为:在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应,然后用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开,再加入酶标记的抗原或抗体,通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
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