苏州乾芸仪器科技有限公司
阅读:63发布时间:2014-10-8
微重力三维细胞培育在国内似乎用的人不是许多,本文在此就简单介绍一下该技术的原理,如果您对此有兴趣,请与我们: 苏州乾芸仪器科技有限公司 电子:info@genintech.com !为使得本文理解更简单,更贴近从事细胞培养工作人员实际所关心的问题,本文将就三维细胞培养技术以问答的形式进行展开、描述如下。
1. 旋转式细胞培育体系(以下简称RCCS)生物反应器是怎么作业的?
RCCS生物器是由中心的一个同轴氧合器以及一个水平旋转培育皿所构成的。当培育皿充溢培育基而且旋转时,培育基像固体一样围着水平轴旋转。氧合器与容器壁以一样的角速度旋转。这些条件使得培育容器内发生层流和zui小的剪切力。细胞由离心力,重力和科式力效果而成悬浮状况,因而在RCCS生物反应器的细胞遭到zui小的机械应力和高通量运送(营养物质,氧气等)因而能集合构成类安排聚合物。气体传输经过硅树脂氧合器传输,然后避免气泡的构成和湍流。
2. 当我经过平板培育得到好的成果时为啥我要换成3D细胞培育?
二维细胞培育对咱们对细胞生物学的理解做出了很大的奉献,可是能从中获取的信息量仍是有约束性的。科学家尽管对过去100年的传统细胞培育技能很满意,可是这不再具有必要性。安排培育,依据界说,尽量仿照体内环境,而且很显然,活着的生物日是三维的,而不是二维的。因而,为了树立仿照体内生物学模型,体外培育体系必定成为三维的。
3. 与其他三维细胞培育体系比较,RCCS生物反应器的长处是啥?
细胞嵌入盘或许多孔板的三维细胞外基质为zui近zui常用的三维细胞培育办法。这个办法尽管能够发生相对不错的3D安排模型,可是它又被有限的物质传递(这是因为培育的静态特性,也因为基质关于物质传输是一个额定的屏障)和缺少可测量性所约束。 动态的培育体系,例如搅拌瓶,或许大规模的搅拌罐供应了非常好的物质传递,可是这些体系运用的机械应力,不只损坏细胞,而且还阻挠了它们的集合。 如前所述, RCCS生物反应器供应了非常好的质量传递和低机械应力答应了3D聚合物的构成。许多依据本生物反应器的研讨显现了其在3D细胞培育方面的优势。以下连接为成功运用RCCS生物反应器进行3D细胞培育的各种不一样研讨的文献。
4. 细胞是不是在RCCS生物反应器的一个当地逗留? 不,细胞和细胞集合体会在培育基中漂浮,这是生物反应器中观察到的高物质传输的重要因素之一。
5.怎么坚持微重力生物反应器里的温度? 生物反应器有必要放在恒温箱里,恒温箱的温度能够设定和维持在37℃。
6.我怎么保证培育所需氧气?
正如前面说到(疑问5),生物反应器是放置在恒温箱里的。依据培育所需,经过硅树脂氧合器,恒温箱中的空气会分散入培育皿中。如果有较大的培育容器,有泵能够使恒温箱的空气供应满意培育所需。因为所有的气体传输是经过分散完结,因而全过程不会发生气泡和湍流。
7.培育容器应该以啥速度旋转?
这取决于细胞聚合体的直径。当容器滚动时,细胞聚合体加快,直到他们抵达堆积速度,而该速度取决于细胞聚合体的巨细。依据斯托克斯方程,沉降速率跟着细胞聚合体半径的平方而添加。因而,跟着聚合体体积上的添加,它们沉降的更敏捷,一起为了避免细胞聚合体与培育壁的磕碰有必要添加旋转速度。因而,一开始可能以慢速旋转培育,例如7rpm,当细胞聚合体在体积上添加而且变得可见,再添加旋转的速度。
8.我能看到反应器中的气泡吗?
苏州乾芸仪器科技认为RCCS生物反应器的首要意图将使效果在细胞上的机械应力减到zui小。乃至很少的气泡的存在将添加湍流和机械应力; 因而RCCS生物反应器是零顶部空间操作,而且气体传输是经过分散完结以此来避免气泡的构成。或许跟着时刻的推移,因为细胞的呼吸会有小气泡发生,去掉些小气泡也是有很必要的(注射器能够被用于有用的去掉气泡)。
9. RCCS生物反应器有啥不一样的运用?
RCCS生物反应器的zui初意图是仿照微重力。在运用这台反应器用于地上试验时期,咱们发现这些反应器中的细胞构成3D聚合体。从那以后,这些RCCS生物反应器被用于细胞和安排培育的几个范畴。 RCCS生物反应器的运用范围从根底细胞生物学到航天生物学,干细胞培育以及再生医学和药物开发,在将来,或许运用于疾病的和损害医治。关于RCCS生物反应器的各式各样运用的具体阐明,请点击这儿(加上连接)。
10. 这是不是是转瓶培育?
转瓶包括一个纵轴封瓶以及周围包裹的弹性塑料壁。在这种情况下,气体运送是经过瓶颈。而且,转瓶培育的意图不是三维培育,而是二维培育。培育物沿着瓶壁成长,而且,当瓶滚动,培育物就会与媒介触摸。因而,这两个体系之间没有相似性(拜见疑问1RCCS生物反应器的作业原理)。
11.当我想在微载体珠上培育细胞时,在我装载它们进入反应器之前细胞是不是需求附在微珠?微珠和细胞能够一起被装载入反应器,但又独立互相。在它们两个被装载入反应器以后在反应器里边的细胞就会自动地附着微珠。
12.运用微重力生物反应器时需求一个恒温箱吗?
是的,恒温箱是为了坚持培育的温度,pH值,氧气供应量。应当留意水是从硅酮氧合器蒸腾到恒温箱的。这个将致使培育皿中发生气泡。所以,为了坚持水蒸气的浓度,避免在培育容器中的蒸腾,恒温箱里的湿度也是很重要的
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