苏州乾芸仪器科技有限公司
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阅读：828发布时间：2014-12-29
一． 污染的防止
进行PCR操作时，操作人员应当严格遵守一些操作规程，zui大程度地下降也许呈现的PCR污染或根绝污染的呈现。
（一）区分操作区：当前，一般PCR尚不能做到单人单管，乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱完成*闭管操作，但无论是不是能够到达单人单管，均要求试验操作在三个不一样的区域内进行，PCR的前处理和后处理要在不一样的阻隔区内进行：
1. 标本处理区，包含扩增摸板的制备；
2. PCR扩增区，包含反响液的制造和PCR扩增；
3. 产品剖析区，凝胶电泳剖析，产品摄影及重组克隆的制备。
各作业区要有必定的阻隔，操作器件，要有必定的方向性。如：标本制备→PCR扩增→产品剖析→产品处理。
牢记：产品剖析区的产品及器件不要拿到其他两个作业区。
（二）分装试剂：PCR扩增所需求的试剂均应在装有紫外灯的超净作业台或负压作业台制造和分装。一切的加样器和吸头需固定放于其间，不能用来吸取扩增后的DNA和其他来源的DNA：
1． PCR用水应为高压的双蒸水；
2． 引物和dNTP用高压的双蒸水在无PCR扩增产品区制造；
3． 引物和dNTP应分装贮存，分装时应标明时刻，以备发作污染时查找缘由。
(三) 试验操作留意事项 尽管扩增序列的残留污染大多数是假阳性反响的缘由，样品间的穿插污染也是缘由之一。因而，不只要在进行扩增反响是慎重认真，在样品的搜集、乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱抽提和扩增的一切环节都应当留意：
1. 戴一次性手套，若不当心溅上反响液，当即更换手套；
2. 运用一次性吸头，禁止与PCR产品剖析室的吸头混用，吸头不要长时刻露出于空气中，防止气溶胶的污染；
3. 防止反响液飞溅，翻开反响管时为防止此种情况，开盖前稍离心搜集液体于管底。若不当心溅到手套或桌面上，应马上更换手套并用稀酸擦洗桌面；
4. 操作多份样品时，制备反响混合液，先将dNTP、乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即能够削减操作，防止污染，又能够增加反响的度；
5. zui终参加反响模板，参加后盖紧反响管；
6. 操作时建立阴阳性对照和空白对照，即可验证PCR反响的可靠性，又能够帮忙判别扩增体系的可信性；
7. 尽也许用可更换或可高压处理的加样器，因为加样器zui简单受产品气溶胶或标本DNA的污染，*运用可更换或高压处理的加样器。如没有这种特别的加样器，乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱至少PCR操作过程中加样器应当，不能穿插运用，尤其是PCR产品剖析所用加样器不能拿到其它两个区；
8. 重复试验，验证结果，慎下结论。
（四）选择质量好的乾芸GENIN PCRroom-1st操作台PCR操作箱，以防止样本外溢及外来核酸的进入，翻开离心管前应先离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻，以防管内液体溅起。
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