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ELISA实验样本制备和贮存要闻

时间:2018-5-16阅读:213
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  在elisa实验中,经常会检测到不同的实验样本,比如常见的有血清,细胞上清等,另外还有检测的样本有可溶性蛋白,血浆,尿液,细胞培养上清,今天为大家简单介绍一下关于样本制备和储存的方法,仅供大家参考:

    检测可溶性蛋白样本:根据产品说明书制备血清、血浆标本,由于有些样品对温度敏感极易丧失活性,应尽快分离并分装(一般300~500ul/管),大多数标本收集和实验在同一天应贮存在2~8℃。若无法立即测定,应贮存在-70℃,标本贮存时间一般不宜过长,避免反复冻融。使用前将标本平衡至室温,融化标本严禁使用水浴锅。冻存后或冷藏时间过长的标本可能会出现沉淀或小凝集块,应在实验前离心或过滤(0.45um滤膜)标本,体积少的标本不建议过滤。所有标本的收集要使用无菌管,在无菌/半无菌条件下操作防止污染。

  检测血清样本:将血液在室温凝集10~15分钟,1500g离心20~30分钟,小心吸取血清。

  检测血浆样本:按试剂盒中的说明书选择抗凝剂。收集血液时,轻轻摇动试管使抗凝剂与血液充分混合。将血液在室温保存 10~15分钟,1500g离心15~20分钟,小心吸上层血浆。

  检测尿液样本:将尿液收集在无菌的容器内。1500g离心10~15分钟或过滤(0.45um滤膜)去除杂质。注意:对于尿液标本实验的回归系数可能发生变化。

  检测细胞培养上清液:1500g离心10~15分钟去除细胞和细胞残渣。若使用常规典型的培养基,应制备两条标准曲线,一条使用标准品稀释液/或实验缓冲液配制标准品,另一条以细胞培养基配制标准品。若两条标准曲线的变化范围在10%内,实验结果可用任一曲线分析。

检测细胞相关和细胞内蛋白:细胞相关蛋白和其它细胞内蛋白在ELISA实验前需要对标本进行处理将目的蛋白释放出来。

 上述几种elisa样本是在实验中会比较常见的几种,我司技术人员为大家做了一个简单的介绍,如有其他疑问,可我司,我司将安排专业的技术人员为您解答

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