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CCK-8(WST-8)细胞分析旗舰产品看Abbkine

阅读:134发布时间:2017-3-1

Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),适用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

Figure.1 CCK-8(WST-8)反应机制

实验原理:

WST-8属于MTT的升级产品,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。

用途:

CCK-8法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增  殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

 

为什么将Cell Counting Kit (CCK-8) 作为细胞增殖与毒性检测佳选择:

  • 如下表,CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较,结果不言而喻!

 

检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK-8法
甲臜产物的水溶性差(需加有机溶剂溶解后再检测)
产品性状粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液
使用方法配成溶液后使用现配现用即开即用即开即用
检测灵敏度很高很高
检测时间较长较短较短zui短
检测波长560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm
细胞毒性高,细胞形态*消失很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变
试剂稳定性一般较差一般很好
批量样品检测可以非常适合非常适合非常适合
便捷程度一般便捷便捷非常便捷

* 细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到佳测定时间

* 酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰(扣除空白孔即可)

 

如何选择合适的CCK-8检测试剂盒

目前市面上能提供的【CCK-8】细胞增殖/毒性检测试剂盒有国产分装或原产的,国产分装的CCK-8试剂盒在质量稳定性上有不足。而原产于国内实验室的CCK-8试剂盒有些具有较好的检测结果,在批次之间的稳定性上较难控制。至于*供应CCK-8试剂盒的进口品牌并不多,就连Abcam、Thermo,Sigma等等几个品牌都不能够提供CCK-8试剂盒,而其它品牌在性价比上远逊于Abbkine产品。

 

作为Abbkine品牌旗下细胞分析旗舰产品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研发工程师为其倾注了大量的投入,不断摸索优化佳的配方,每一份努力只为让科研工作者更加简单,,稳定地获取珍贵的科研数据。

 

产品名称及描述货号产品说明
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)KTC011001详情

 

本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作 。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。

 

《【CCK-8】细胞增殖/毒性检测试剂盒综合对比》

品牌(规格)AbbkineSigmaDojindo
100次200 元703.17 元350 元
500次640 元2779.92 元890 元
2000次2050 元13899.6 元(3000次)——
10000次7180 元——8380 元

 

实验注意事项:

  • 建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
  • 有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK-8试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基页面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。
  • 白细胞可能需要培养较长时间。
  • 当使用标准96孔板时,贴壁细胞的zui小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此*接种量不低于2,500 个/孔 (100 μL 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。
  • 如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度zui高。
  • 如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。当然药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

更多详情:请浏览下方链接

CCK-8实验操作指南:

CCK-8常见问题汇总:

 

Abbkine品牌在2012年成立于美国加利福尼亚州,随着亚洲市场的迅猛增长,Abbkine将总部搬迁至中国,转移其生产线和相关技术,由中方资本控股,并整合各方面资源,历史性地开辟了中国生产基地,立足中国,服务。结合了Abbkine*和中国制造两方面的巨大优势,致力于提供高品质,买得起的免疫分析试剂、标签及内参抗体、特色二抗、蛋白质纯化产品和其它分子生物学试剂盒,以满足世界各地的大学科研所、医院研究以及生物医学研究机构科学家的研究与分析需求。

作为Abbkine中国区域总代理,艾美捷将为客户提供的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物,蛋白质纯化产品以及相关试剂盒等。同时我们作为多家品牌的的中国代理或区域代理,艾美捷能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣,请致电免费客户专线到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。


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