ELISA试剂盒样本与实验的重要性

ELISA试剂盒即酶联免疫吸附法，是一种常用的固相酶免疫测定办法。 由于ELISA办法简略，便利，活络，特异性强且不需求特别设备（只需求酶标仪就可以），所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。
可是影响ELISA测定的要素有很多，而其操作中需求有一定的技能请求，如操作办法，环境，样本等，有时常可见到一些错误成果（即假阳性或假阴性）等，样本的重要性关系到全部试验的成果，上海极威生物为我们解读ELISA检查的影响要素之一-样本的影响
1、ELISA试剂盒样本的保留：在冰箱中保留过久的标本，在间接法ELISA测定中会致使本底过深、会构成假阳性；为防止上述问题，在测定血清标本时能新鲜收集；假如不能当即测定，依据相应的时刻保留相应的温度，5 d内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应-20℃低温冻存；如冻存后融解的标本，蛋白质有些浓缩，散布不均，应充沛混合后再测定，但混匀时应轻柔，不行强烈振动。
2、样本的时刻：由于塑料试管能吸附抗原物质，所以样本长时刻放在塑料管内会使样本内抗原含量降低构成假阴性。的办法是运用真空*；并运用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会添加OD值，EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA体系中辣根过氧化物酶活性。
3、样本受细菌污染：因菌体中可能会含有内源性辣根过氧化物酶，因而，被细菌污染的标本同溶血标本一样，可能会发生非特异性显色而干扰测定成果。
4、ELISA试剂盒样本的凝结：样本凝结不全。在试验中，有的时分心急为了争取时刻快速检查，在血液还未开端凝结的时分就强行离心别离血清，致使血清中仍残留有些纤维蛋白原，在ELISA测定过程中构成肉眼可见的纤维蛋白块，易构成假阳性成果；因而血液标本收集后有必要使其充沛凝结后再别离血清。
5、ELISA试剂盒样本溶血：溶血标本及混有红细胞的血清选用ELISA法检查易发生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质（红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素），在洗刷过程中往往难以*洗脱，它可使H2O2释放出原生态氧（O），然后催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质，即显蓝色，发生假阳性［2］。所以严峻溶血标本禁用。