上海晶抗生物工程有限公司
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阅读：205发布时间：2016-11-1
ELISA试剂盒斑点ELISA方法的首要操作程序为：
(1)载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后，稍加单调进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检查抗原适度稀释后参加圈中，置37℃使硝酸纤维素膜*单调。每张7cm×2.3cm的膜通常可点加40－53个样品，每个压圈可加抗原液1－20μl。
(2) 封闭 将硝酸纤维素膜置于封闭液中，37℃感作15－30分钟。封闭液多选用富含正常动物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。
(3) 加被检血清 可直接在抗原圈上加，也可剪下抗原圈、置于微量板孔中，再参加必定量适度稀释的待检血清，37℃反响必定时刻，用洗刷液洗三次，每次1－3分钟。洗刷液通常为必定浓度的PBS-Tween溶液。
(4) 加酶标抗体，37℃反响必定时刻后，用洗刷液洗三次。
(5)显色参加新鲜制作的底物液，37℃反响必定时刻后，去掉底物液，加蒸馏水洗刷中止反响。
(6) 作用断定 以阳性、阴恶血清作为对照，膜片基地呈现深棕赤色斑驳者为阳性反响，否则为阴性反响。
ELISA试剂盒斑点ELISA(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)（Dot-ELISA(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)） 与惯例的微量板ELISA(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)对比，Dot-ELISA(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)具有简练、节省抗原等利益，而且作用可长时刻保留；但其也有缺少，首要是在作用断定上对比片面，特异性不行。
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