上海晶抗生物工程有限公司
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阅读：330发布时间：2016-11-15
ELISA试剂盒操作过程
①兔抗人IgG 作为抗原，用包被液l：8000稀释，100μL/孔参加聚苯乙烯96孔反响板中。4℃放置过夜。
②洗刷：次日倾去凹孔内的液体，洗刷液洗3次。
③封闭：加l00μL/孔封闭液，室温放置0.5h.
④洗刷：用洗刷液洗3次。
⑤加待测样品(一抗)：将含单克降抗体的细胞培养上清在另-块板上用PBS 连续稀释(依照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，每个样品平行做两份，PBS或空白培养基作为阴性对照。
ELISA试剂盒已知样品作为阳性对照。加盖37℃恒温箱温育 1~2h。
⑥洗刷：用洗刷液洗3次。
⑦加酶标抗抗体：兔抗鼠IgG-HRP，用封闭液l ：8000稀释，100μL／孔，加盖37℃恒温箱温育1h。
⑧洗刷：用洗刷液洗5次，蒸馏水洗2次。
⑨显色：加新鲜制造的底物溶液100μL/孔，室温暗处放置5～30min，显现蓝色。
⑩停止反响、比色：加50μL/孔停止液。色彩变黄；ELISA试剂盒用酶标仪测定450nm 处各孔的吸光值，阳性反响的zui大稀释度为待测样品的效价。
自个也为此烦恼过很长一段时间，跟着自个技术水平得前进，或多或少地也把握了ELISA体系的脾气，也是游刃有余吧，如今做方阵，ELISA试剂盒已是轻车熟路了，曾经检查一种抗体用整整一下战书还算得晕晕的，如今给我十个八个的从包被到显色，一个工作日根本搞定。
ELISA试剂盒检查系统可谓是免疫学反响应用到科研出产中zui为灵敏的技术手段。
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