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处理ELISA试剂盒的方发法

阅读:300发布时间:2017-5-15

做elisa试验样本的处理及请求:
1.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲刷组织,去掉残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响丈量成果),称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(通常按1:9的分量体积比,比方1g的组织样品对应9mL的PBS,详细体积可根据试验需求恰当调整,并做好记录。推荐在PBS中参加蛋白酶抑制剂)参加玻璃匀浆器中,于冰上充沛研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或重复冻融。zui终将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检查。
2.血清:将搜集于血清别离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保留,但应防止重复冻融。
3.血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂收集标本,并将标本在收集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检查,或将上清置于-20℃或-80℃保留,但应防止重复冻融。
4.细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检查,或将上清置于-20℃或-80℃保留,但应防止重复冻融。
注:标本溶血会影响zui终检查成果,因而溶血标本不宜进行此项检查。

 


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