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正确操作小鼠ELISA试剂盒的步骤

阅读:135发布时间:2017-7-17

小鼠ELISA检查试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中抗BP180抗体(BP180-Ab)的含量。

 

小鼠ELISA检查试剂盒操作过程:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩下板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置规范品孔、样本孔和空白孔,空白孔啥都不加;规范品孔各加不一样浓度的规范品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加*40μL;
4. 随后规范品孔和样本孔中(空白孔不加)参加辣根过氧化物酶(HRP)符号的检查抗体100μL,,用封板膜封住反响孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 一切孔参加底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 一切孔参加停止液50μL,15min内,在450nm波利益测定各孔的OD值。


小鼠ELISA检查试剂盒操作注意事项:试剂盒保留在2-8℃,运用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再运用;试验中不必的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保留;浓度为0 的S0 号规范品即可视为阴性对照或许空白;依照阐明书操作时样本现已稀释5 倍,zui终成果乘以5 才是样本实践浓度;严厉依照阐明书中标明的时刻、加液量及次序进行温育操作。一切液体组分运用前充沛摇匀。

 


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