上海晶抗生物工程有限公司
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阅读：1011发布时间：2017-10-12
从21世纪初期，ELISA试剂盒因为免疫学研究中一个十分活跃的范畴就是细胞因子的研究，它的检测成为现代生物科学研究的重要方面。国内抢先的生物厂家，运用抗原、抗体反响的原理已研发出了高灵敏度（sensitive）、高特异性、高度配套的细胞因子检测试剂盒，出产的检测试剂盒包括简直一切的细胞因子。根据检测办法不同，可分为ELISA测定（酶联免疫）和放射免疫测定。
1. 放射免疫测定
放射免疫测定是将同位素剖析的高灵敏度与抗原抗体反响的特异性相结合，办法大多选用竞赛法原理。待检的细胞因子与放射性同位素符号的细胞因子竞赛与细胞因子抗体（多克隆抗体或单克隆抗体）结合，再经过别离剂别离结合状态的符号物，计数后根据标准曲线即可计算出细胞因子的量。本法具有灵敏度高（可检测出ng乃至pg水平），特异性强、性好等特色。
2.ELISA试剂盒测定
2-1.酶联免疫斑驳（ELISPOT） 检测试剂盒是根据定量夹心ELISA法原理，将影响后的细胞滴加到包被在贴PVDF微孔中，放置于37℃孵育。在孵育的进程中，细胞排泄的细胞因子即会被包被的抗体所捕获，以下的进程与一般的ELISA试验相同，zui终用不溶性的酶联底物进行显色，每一个显色点（斑驳）既代表一个排泄细胞因子的细胞。经过的ELISPOT剖析仪或在显微镜下进行计数，就可以进行剖析。ELISPOT法用于检测单个细胞排泄的细胞因子，综合了一般ELISA办法的高特异性和定量的长处，并且具有生物活性剖析得出与功用相关的成果的长处。
2-2.双抗夹心ELISA法 双抗体夹心法需制备针对细胞因子不同位点的两个单克隆抗体，一个抗体作为固相抗体用于包被，另一个作为符号抗体。可选用惯例双抗夹心法，也可选用一步法。因为血清中细胞因子的含量很低。惯例ELISA法不能满足要求，需引入*－亲合素体系来进步灵敏度，即参加样品后参加*符号的另一个抗体，再参加亲合素及*化的酶，再参加底物进行显色，颜色与待检的细胞因子量呈正比
三、ELISA试剂盒检测细胞因子的优缺陷
A. 长处
1.特异性强，这是符号免疫技能的共同特色。
2.运用简洁，省时。
3.重复性好，影响要素少，试验成果安稳。
B. 缺陷
1.测定的是蛋白的含量而不是生物学活性。
2.检测的灵敏度不如生物学活性法。
3.因为各个试验室制备的抗体不同，同一样品用不同ELISA试剂盒检测的成果也不一样，试验室之间难以进行质量操控
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