上海晶抗生物工程有限公司
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阅读：333发布时间：2016-11-8
ELISA试剂盒使用方法一
间接法
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
次日洗刷3次；
加底物液显色：于各反应孔中参与暂时制造的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
次日，弃去孔内溶液，用洗刷缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗刷，下同）。
间断反应：于各反应孔中参与2M硫酸0.05ml。
加一定稀释的待检样品（不知道抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗刷；
（一同做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，参与新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；
37℃孵育35-60分钟，洗刷；
毕竟一遍用DDW洗刷。
ELISA试剂盒使用方法二
双抗体夹心法
包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。
加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗刷。（一同做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
加酶标抗体：于各反应孔中，参与新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗刷。
效果断定：可于白色布景上，直接用肉眼查询效果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，根据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号标明。
ELISA试剂盒也可测OD值
在ELISA查看仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规矩的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
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