上海晶抗生物工程有限公司
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阅读：178发布时间：2016-12-28
ELISA试剂盒血清中有些细胞因子的检出率很低，血清中又富含很多大分子杂蛋白，在血清浓度较高时简单隐秘抗原的表位，因此在测血清原液经常出现负值。
这便是在我们的说明书中建议查看血清时做1:2稀释的因素。
除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀释外，其它一些细胞因子都要做1:2稀释（这在我们的说明书中有提示）。
ELISA试剂盒实验假如按上诉方法处理后查看仍有负值，则处理数据时能够采用2个方法：
标准曲线只取标准曲线的下面4~5个点，即125，62.5，31.25，15.625，7.8，0，或62.5，31.25，15.625，7.8、3.9、0。
ELISA试剂盒实验原则是把样本的OD值全包含，标准曲线又能至少有4个点。
做法是：先在样本孔中加50ul试剂稀释液（试剂盒中已备），再加50ul样本。
求出样本含量后需要乘上稀释倍数2。
这么改变后，一般样本都能得到数据，低的样本出来了，高的样本含量也会高一些。
由于核算时是相对含量的比照，所以不会影响ELISA试剂盒实验核算效果。
也便是把标准曲线的下端（即样本含量会合的这一段）扩展，求出的数据更可靠。
人为的把“0”pg/ml点OD值降低。
ELISA试剂盒实验原则是把“0”OD值降到比zui低的样本OD略低一点，尽可能使样本的含量满是正值，一同保证改变“0”OD值后的标准曲线的相关系数（r）＞0.98。
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