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细胞因子溶解时溶剂的选择

阅读:316发布时间:2017-1-6

细胞因子中不含载体蛋白或别的添加剂,而且通常以zui少数的盐来进行冻干处理,因此微量的细胞因子在冻干过程中会堆积于管内,构成很薄或不行见的蛋白层。
咱们建议在收到商品后,必须在开盖前先离心,使粘在管盖或管壁上的蛋白集合于管底(此刻能否见到白色沉积均属正常景象)。 
离心:高速离心20-30秒,或低速离心5分钟。 
溶解时不行振动,防止因化学键的开裂形成蛋白失活,可参加恰当的溶剂轻摇并静置一段时间,待细胞因子*溶解后运用。
细胞因子溶解时溶剂的选择: 
请求用去离子水溶解的商品,必须不行用盐溶液,防止过高的盐浓度形成蛋白不行逆的分出; 
请求用盐溶液溶解的商品,请依照细胞因子说明书上的浓度,相同也是为了防止过高的盐浓度。 
溶解:细胞因子用去离子水或其它缓冲液溶解至说明书请求的浓度 (通常为 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的商品,需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。
工作液在4℃可保留1周,如需长时间保留,则需分装冻存于-20℃ (留意:不行冻存于-80℃)。
分装时每管中工作液的体积是一次试验的用量,以完成每次试验用完一只工作液,防止反复冻融导致蛋白活性的下降。
细胞因子分装和储存:细胞因子蛋白溶解后可根据自己的试验需求进一步稀释成工作液,稀释可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其间富含5-10%的FCS(小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)来稳定蛋白。


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