1.包被抗原的挑选
ELISA试剂盒包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类.天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原能够选用间接捕获法包被(先用能够与意图抗原反响的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反响使抗原固相化).ELISA试剂盒经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板.小分子抗原比方多肽以及一些小分子有机化合物,因为分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上.
2.包被液的挑选
一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也能够运用pH7.2的磷酸盐缓冲液.
3.包被温度的挑选
通常是4-8度条件下过夜或许37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的坚持.
4.包被浓度的挑选
ELISA试剂盒包被的zui适浓度随固相载体和包被物的性质改变,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要清晰针对特定包被抗原的zui适包被浓度需要通过试验来断定.
