组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶SETD7试剂盒​操作步骤

组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶SETD7试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

半乳糖凝集素9B(GAL9B)重组蛋白

半乳糖凝集素9C(GAL9C)重组蛋白

胞外5'-核苷酸酶(NT5E)重组蛋白

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重组蛋白

苯酚磺基转移酶(PST)重组蛋白

表面活性物质关联蛋白J(SPJ)重组蛋白

表皮生长因子(EGF)重组蛋白

表皮生长因子受体(EGFR)重组蛋白

丙氨酸氨肽酶(AAP)重组蛋白

丙酮酸激酶(PK)重组蛋白

丙酮酸脱氢酶α(PDHα)重组蛋白

丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)重组蛋白

波形蛋白(VIM)重组蛋白

玻连蛋白(VTN)重组蛋白

补体1抑制因子(C1INH)重组蛋白

补体成分1r(C1r)重组蛋白

补体成分2(C2)重组蛋白

补体成分3(C3)重组蛋白

补体成分4a(C4a)重组蛋白

补体成分7(C7)重组蛋白

补体受体2(CR2)重组蛋白

补体因子H(CFH)重组蛋白

补体应答基因32(RGC32)重组蛋白

不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)重组蛋白

层粘连蛋白α1(LAMα1)重组蛋白

层粘连蛋白β1(LAMβ1)重组蛋白

层粘连蛋白受体1(LAMR1)重组蛋白

叉头框蛋白O1(FOXO1)重组蛋白

叉头框蛋白O3(FOXO3)重组蛋白

肠碱性磷酸酶(ALPI)重组蛋白