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阿留申病病毒探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程

时间:2022/9/27阅读:690
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阿留申病病毒探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程:

一、试剂准备

1. DNA模板

2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步骤

1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

    10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μ

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。

3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测

alpha 1 Fetoprotein甲胎蛋白抗体

ATM毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体

ABCF2ATP结合盒转运蛋白2抗体

ABLIM3肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体

Acidic Calponin酸性钙调蛋白3抗体

phospho-ADAM17 (Thr735)磷酸化CD156b抗体

ADH5乙醇脱氢酶5抗体

ADH6乙醇脱氢酶6抗体

AGPAT5溶血磷脂酰基转移酶5抗体

AIPL1遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体

AIRE免疫调节蛋白AIRE抗体

phospho-AKT1 (Ser473)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体

phospho-AKT1 (Thr72)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体

phospho-AKT1 (Tyr326)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体

ALDH1A2乙醛脱氢酶2型抗体

ALDH9A1γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体

AGPS衰老相关蛋白5抗体

phospho-alpha B Crystallin (Ser59)磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体

AMBN釉基质蛋白抗体

phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体

phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体

phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受体抗体

phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受体抗体

phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受体抗体


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