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大鼠CA125elisa检测试剂盒操作步骤

时间:2023/2/16阅读:260
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大鼠CA125elisa检测试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

糠醇;麸醇;呋喃甲醇Furfuryl alcohol;2-HydroxyMethylfuran;2-Furancarbinol;Furfural alcohol;2-FuranMethanol98-00-0

糠酸;呋喃甲酸;2-呋喃羧酸;焦粘液酸;麸酸Furoic acid;2-Furancarboxylic acid;2-Furoic acid88-14-2

没食子酸;3,4,5-三羟基苯甲酸;五倍子酸;棓酸Gallic acid5995-86-8

GalliuM7440-55-3

单宁酸Tannic Acid (AS)1401-55-4

GDX-102GDX-102

GDX105GDX-105

GDX-303

G,D,X-401GDX-401

GDX-403GDX-403

GDX-501GDX-501

GDX-502GDX-502

甲基紫;甲基青莲;甲基紫2BMethyl violet;Dahlia B;Basic violet 1;PyrokataniuM blue;C.I.425358004-87-3

姬姆氏色素;姬姆萨氏色素;吉氏色素GieMsa-Solution51811-82-6

吉拉尔特试剂T;氯化三甲基铵乙酰肼;乙酰肼三甲基氯化铵Girard's reagent T;2-Hydrazino-N,N,N-triMethyl-2-oxoethanaMiniuM chloride;(CarboxyMethyl)triMethylaMMoniuM chloride hydrazide;Betaine hydrazide hydrochloride;TriMethylacethydrazide aMMoniuM chloride;TriMethylaMinoacetohydrazide123-46-6

戊二酸;胶酸Glutaric acid;n-Pyrotartaric acid;Pentanedioic acid;Dicarboxylic acid C5110-94-1hydrochloride;623-33-6

α-1,6 葡聚糖GLYCOGEN9005-79-2

石墨粉;黑铅;笔铅Graphite powder;Black lead;Mineral carbon7782-42-5


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