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elisa定量检测试剂盒检测方法和抗体分析

时间:2017-4-14阅读:138
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elisa定量检测试剂盒如今检测ELISA有许多途径,我们可以根据自己的偏好进行选择。
一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物,抗体上结合有相应的酶(例如通常使用的辣根过氧化物酶HRP),而反应体系中添加有相应的底物(如3,3-二氨基联苯胺DAB)。
这种酶促反应生成具有特征性的颜色,可以通过分光光度计进行检测,碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。
单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于elisa定量检测试剂盒,实际上有时候二者结合效果更好。例如,对于双抗夹心法而言,用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有帮助。
多抗能够确保捕获所有抗原,随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。
elisa定量检测试剂盒如果抗体间发生冲突或交叉反应就会影响整个实验的特异性。其中抗体来源所带来的兼容性就是交叉反应的一个因素。
尽管现在购买源自动物的抗体越来越容易,我们仍有必要确认一下是否会产生交叉反应的问题。在用双抗夹心法进行ELISA检测时,检测用的二抗必须特异性针对检测一抗,而不能与捕获抗体起反应。
如果检测用二抗与捕获抗体结合,实验特异性就会大打折扣。elisa定量检测试剂盒通常我们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗,来避免上述问题。

 

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