大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞 返回列表页

实验操作步骤：  

a．采用认可的方案处死啮齿动物。

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

产品属性：

产品介绍：

名称    大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞

2.组织来源：胎盘组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。绒毛膜是由滋养层和胚外中胚层的壁层构成。胚泡植入子宫内膜后，在胚泡表面形成许多绒毛样的突起，以细胞滋养层为中轴，外裹合体滋养层，称初级干绒毛。胚外中胚层长入初级干绒毛的中轴，使初级干绒毛变成了次级干绒毛。当绒毛膜的胚外中胚层内形成血管网和结缔组织，并与胚体内的血管相通时，次级干绒毛改称三级干绒毛。三级干绒毛末端的细胞滋养层细胞形成细胞滋养层壳。随着胚胎发育，丛密绒毛膜与基蜕膜共同构成了胎盘，而平滑绒毛膜则和包蜕膜一起逐渐与壁蜕膜融合。

5.方法简介：

()实验室分离的大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞采用-DNA酶联合消化法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞经Cytokeratin-7免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件PLL（0.1mg/ml）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-R182

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态梭形、多角形

传代特性可传1-2代

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

1瓶 COS-7 [COS7]细胞株 COS-7 [COS7] 低温运输和保存

牛津琼脂（OXA）平板（9cm） Oxford Agar Base 10个/包

200U T4聚核苷酸激 T4 Polynucleotide Kinase -20℃保存

100mL PIPES Buffer，0.5M, pH8.0  PIPES Buffer，0.5M, pH8.0  常温保存

100mL YPDG液体培养基 YPG Liquid Medium 常温

2 ug pPIC9k-His pPIC9k-His 低温运얾嵌쐛L⪀

大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞C19orf24  19号染色体开放阅读框24抗体 规格: 0.2mlPGGT1B/FNTB  蛋白香叶烯基转移1β（FTβ）抗体 规格: 0.2ml

HSP70/HSPA1A  热休克蛋白-70抗体 规格: 0.1ml

CRLR/CGRPR1  降钙素基因相关肽1型受体抗体 规格: 0.1ml

Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml

Proteasome 20S alpha + beta  蛋白体PSMα+β抗体 规格: 0.2ml

2 ug pcDNA4/TO/Myc-His B pcDNA4/TO/Myc-His B 低温运输，-20℃保存

Cryopyrin/CIAS1/NALP3  细胞凋亡诱导蛋白NALP3抗体 规格: 0.1mlGoat Anti-Chicken IgG/HRP  辣根过氧化物标记的羊抗鸡IgG 规格: 0.1ml

1mL Tricine-SDS-PAGE上样液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存

CIN-1培养基基础 Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 250g

肝肉琼脂培养基  250g

100mL AMP Buffer，0.5M，pH9.0  AMP Buffer，0.5M，pH9.0  常温保存

2 ug RCIscript-GoldyTALEN RCIscript-GoldyTALEN 低温运输，-20℃保存