当前位置:上海谷研实业有限公司>>生化检测试剂盒>>糖代谢系列>> 糖原含量可见分光光度法检测试剂盒
货号 | GOY-01S6730 |
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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6730 |
商品介绍:
测定意义
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖,是糖的主要的储存形式之一,主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量,分别称为肝糖原和肌糖原。肝糖原可调节血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。因此,肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时,肌糖原不能直接分解成血糖,必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理:
蒽酮法。利用强碱性提取液提取糖原,在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
内酯 分析标准品3,4-二甲氧基苯磺酸氯 98%sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit 大鼠分泌型磷脂A2
蒿甲 98%(R)-3,3-二甲基-2-丁 ≥99.0%cPLA2(Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 )ELISA Kit 大鼠胞浆型磷脂A2
98%(S)-3,3-二甲基-2-丁 99+%I CTP (Rat Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP) ELISA Kit 大鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽
分析标准品3,5-二乙酸 98%Tn-T (Rat Troponin T,Tn-T )ELISA Kit 大鼠肌钙蛋白T
0.98N,N-二甲基间苯二, 99%CD8 大鼠CD8分子
双氢 分析标准品,≥98%4-二基肉桂酸 99%(EGFR)ELISA Kit 大鼠因子受体
多巴 99%N,N-二甲基-3- GR,99%(IL-2sR)ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受体
95%N,N-二甲基-3- 98%(Ntn1)ELISA Kit 大鼠轴突生长诱向因子1
糖原含量可见分光光度法检测试剂盒鸡白介素1(IL-1)免疫试剂盒*直销
大鼠骨保护素(OPG)免疫试剂盒现货供应
ZT)免疫试剂盒进口、组装
Tau蛋白免疫试剂盒*直销
成纤维细胞生长因子4(FGF4)免疫试剂盒进口、组装
牛弹性蛋白2,中性粒细胞(ELA2)免疫试剂盒进口、分装
次黄氧化免疫试剂盒现货供应
胱抑素SN(CST1)免疫试剂盒现货供应
小鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)免疫试剂盒进口、组装
电子转运黄素蛋白-泛醌氧化还原/电子转运黄素蛋白脱氢(ETFDH)免疫试剂盒*直销
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