雪腐镰刀菌 返回列表页

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

N-苯甲酰-L-乙酯 98%L-去腺素 98%Anti-SCP3/FITC  荧光素标记联会复合体蛋白3抗体IgG

N-(叔丁氧羰基)乙 96%侧链酸 98%Anti-Secretin/FITC  荧光素标记分泌素抗体IgG

卡特缩合剂 98% 5-苄硫基四氮唑 98.5%Anti-Secretin receptor/FITC  荧光素标记分泌素受体抗体IgG

舒缓激肽三醋酸盐  95%5-巯基-1-甲基四唑 98%Anti-SEL1L/FITC  荧光素标记SEL1L抗体IgG

BOC-L- 98%甲氧基盐酸盐 98%Anti-Selenoprotein W/FITC  荧光素标记硒蛋白W抗体IgG

BOC-L- 97%叠氮钠 AR,99%（剧品）Anti-Sema3A/FITC  荧光素标记臂板蛋白3A抗体IgG

S-苄基-L-半胱 98%四氮唑乙酸 98%Anti-Sema3F/FITC  荧光素标记臂板蛋白3F抗体IgG

Boc-L-天冬 4-苄酯  98%油酸 ARAnti-Sema4C/FITC  荧光素标记臂板蛋白4C抗体IgG

雪腐镰刀菌芴氧羰酰 98%小鼠神经型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫试剂盒丁酰辅A合成3抗体TG  兔抗状腺球蛋白

芴氧羰酰 99%小鼠神经粘附分子1(NCAM1)免疫试剂盒脂肪源性亮氨氨肽抗体（血管内皮生长因子诱导蛋白）TFR2/Transferrin Receptor 2  转铁蛋白受体2抗体

4-(羟)氧乙 98%小鼠神经特异性烯化(NSE)免疫试剂盒线粒体凋亡诱导因子2抗体TFPI-2  组织因子途径抑制剂-2抗体

并三氮唑-N,N,N',N'-四脲六氟酯 99%小鼠神经肽Y(NPY)免疫试剂盒ABL2蛋白抗体TFPI/LACI  组织因子途径抑制剂抗体

1-羟-并-三氮唑(无水) 99%小鼠神经丝蛋白L(NF-L)免疫试剂盒血管紧张素转换ACE1抗体TFF3  三叶肽因子3抗体

3-羟-1,2,3-并三-4(3H)-酮 98%小鼠神经生长因子前体(proNGF)免疫试剂盒血管紧张素转换2抗体TFF2  三叶肽因子2抗体

2-(7-偶氮并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟酯 99%小鼠神经生长因子(NGF)免疫试剂盒Acinus抗体TFF1/BCEI  癌雌激素诱导蛋白抗体

1-羟-7-偶氮并三氮唑 99%小鼠神经胶质纤维性蛋白(GFAP)免疫试剂盒醋激1抗体TFEB  T淋巴转录调节因子TFEB抗体

N-羟-5-降稀-2,3-二酰亚 99%小鼠神经调节蛋白4(NRG4)免疫试剂盒促皮质激素(1-39)抗体TFE3  转录因子E3

N-羟琥珀酰亚 98%小鼠神经调节蛋白3(NRG3)免疫试剂盒促皮质激素ACTH(18-39)抗体TFDP3  转录因子DP3抗体（肝癌相关抗原661）

N-羟硫代琥珀酰亚 98%小鼠神经调节蛋白2(NRG2)免疫试剂盒促皮质激素ACTH (7-23)抗体TFDP2/DP2  转录因子E2F二聚体蛋白2抗体

4-羟 99%小鼠神经调节蛋白1(NRG1)免疫试剂盒活性依赖的神经保护肽抗体TFCP2C  转录因子CP2抗体

3-羟-9H-占吨-9-酮 98%小鼠上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫试剂盒α1性糖蛋白1/类粘蛋白1抗体TFAR19/PDCD5  凋亡相关蛋白5抗体

1,2-二氢-2-异丁氧喹啉-1-异丁酯 98%小鼠山梨脱氢(SDH)免疫试剂盒α1性糖蛋白2抗体（类粘蛋白2）Tetraspan 5  四分子交联体5抗体

异烯酯 98%小鼠沙眼衣原体抗体IgG(CT IgG)免疫试剂盒化水通道蛋白2抗体Tetranectin/CLEC3B/TNA  四连接素TN抗体