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实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)elisa试剂盒 |
英文名称 | Rat bone morphogenetic protein 3,BMP-3 ELISA Kit |
货号 | GOY-R74241 |
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
血管生成素1(ANGPT1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 谷氨酸棒杆菌 100g
血管生成素1(ANGPT1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 干酪乳杆菌 25g
血管生成素2(ANGPT2)(酶联免疫吸附试验法) 98% 假单胞菌属 5g
血管生成素2(ANGPT2)(酶联免疫吸附试验法) 97% 微球菌 1g
β细胞素(βTC)(酶联免疫吸附试验法) 97% 苏云金芽孢杆菌松蠋亚种 5g
β细胞素(βTC)(酶联免疫吸附试验法) 98% 饲料 铅 25g
上皮性钙黏附蛋白(CDHE)(酶联免疫吸附试验法) 98% 南方散斑壳 5g
髓样前体细胞抑制因子1(MPIF1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 枯草芽孢杆菌 100g
粘膜关联上皮趋化因子(MEC)(酶联免疫吸附试验法) 98% 异常汉逊酵母异常变种 25g
CD83分子(CD83)(酶联免疫吸附试验法) 98% 冠突散囊菌 5g
睫状神经营养因子(CNTF)(酶联免疫吸附试验法) 大肠埃希氏菌 100mg
血管内皮细胞蛋白C受体(PROCR)(酶联免疫吸附试验法) 赤曲霉 1g
内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)(酶联免疫吸附试验法) 椭圆孙秀芹氏菌 500mg
内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)(酶联免疫吸附试验法) 98% 双胞双镰孢 100g
嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)(酶联免疫吸附试验法) 98% 桃色枝顶孢 25g
红细胞生成素受体(EPOR)(酶联免疫吸附试验法) 98% 松针散斑壳 5g
红细胞生成素受体(EPOR)(酶联免疫吸附试验法) 97% 同丝毛壳 25g
E选择素(SELE)(酶联免疫吸附试验法) 97% 酿酒酵母 5g
大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)elisa试剂盒冰冻切片组织CDK3蛋白表达NBT显色光学显微镜 GPRASP2 100 ul
石蜡切片组织CDK3蛋白表达NBT显色光学显微镜 GPR137B 100 ul
细胞CDK3蛋白表达比色法定量 GPD1L 100 ul
细胞CDK3蛋白表达荧光定量 GPBP1 5 mg
CDK3蛋白表达西方杂交分析 GNPDA2(Glucosamine-6-phosphate isomerase 2) 1 mg
CDK3蛋白免疫共沉淀分析 GNPNAT1 100 ul
CDK3蛋白表达定量 GNPDA1 100 ul
?细胞CDK4蛋白表达流式细胞仪 GNRHR2 50 mg
载玻片细胞CDK4蛋白表达荧光显微镜 GOLPH3 100 ul
冰冻切片组织CDK4蛋白表达荧光显微镜 GPM6A 10 mg
石蜡切片组织CDK4蛋白表达荧光显微镜 GPN1 100 ul
载玻片细胞CDK4蛋白表达NBT显色光学显微镜 GPR101 100 ul
冰冻切片组织CDK4蛋白表达NBT显色光学显微镜 GOPC 100 ul
石蜡切片组织CDK4蛋白表达NBT显色光学显微镜 GORAB 100 ul
细胞CDK4蛋白表达比色法定量 GORASP2 100 ul
细胞CDK4蛋白表达荧光定量 GOSR2(Golgi SNAP receptor complex member 2) 100 ul
操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
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