PAI-1 elisa试剂盒说明书 返回列表页

公司采用的全是进口原材料研，发灵敏性高，高效性，*抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。

实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
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样品收集、处理及保存：
1）.细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2）细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3）血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4）血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。
5）体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6.）组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
PAI-1 elisa试剂盒说明书操作步骤：
1）运用前，将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡，发生加样上的差错。
2）依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定，能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内。
3）参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，悄悄振动混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
5）每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，悄悄振动混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
7）每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀，37℃温育10分钟。防止光照。
8）取出酶标板，敏捷参加50ul停止液，参加停止液后应当即测定成果。
9）在450nm波利益测定各孔的OD值。
全组织琥珀酸脱氢酶活性染色　OAS3(2′-5′-oligoadenylate synthase 3) 　20 ul

冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色　PRDX6(Peroxiredoxin-6) 　100 ul

全组织细胞色素C氧化酶活性染色　TTN(Titin) 　100 ul

冰冻切片细胞色素C氧化酶和琥珀酸脱氢酶（Combined COX-SDH）双酶活性染色　FSCN1(Fascin) 　500 ul

全组织细胞色素C氧化酶和琥珀酸脱氢酶（Combined COX-SDH）双酶活性染色　TPI1(Triosephosphate isomerase) 　100 ul

冰冻切片NADH心肌黄酶和琥珀酸脱氢酶（Combined NADH-TR-SDH）双酶活性染色　RNASE3/ECP(Ribonuclease A3/Eosinophil Cationic Protein) 　100µl

全组织NADH心肌黄酶和琥珀酸脱氢酶（Combined NADH-TR-SDH）双酶活性染色　PDXK(Pyridoxal kinase) 　100 ul

冰冻切片酸性磷酸酶活性染色　POMGNT1(Protein O-linked-mannose beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase 1) 　20 ul

全组织酸性磷酸酶活性染色　HMGCS1(Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, cytoplasmic) 　100 ul

冰冻切片酰胆碱脂酶活性染色　GDF2(Growth/differentiation factor 2) 　100 ul

全组织酰胆碱脂酶活性染色　OSMR(Oncostatin-M-specific receptor subunit beta) 　100 ul

冰冻切片肌腺苷酸脱氨酶（Myoadenylate deaminase）活性染色　OIT3(Oncoprotein-induced transcript 3 protein) 　100 ul

全组织肌腺苷酸脱氨酶（Myoadenylate deaminase）活性染色　DEFA5(Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) 　100 ul

冰冻切片非特异性酯酶（Non-specific esterase）活性染色　CTSG(Cathepsin G) 　100 ul

全组织非特异性酯酶（Non-specific esterase）活性染色　PRKAB1(5′-AMP-activated protein kinase subunit beta-1) 　100 ul

冰冻切片肌肉磷酸化酶（Myophosphorylase）活性染色　GNRHR(Gonadotropin-releasing hormone receptor) 　100 ul
H2S硫化氢种属: Nidula│niveotomentosa白绒红蛋巢

heparan sulfate硫酸类肝素种属: Streptomyces│cyaneus蓝色链霉菌

CSGALNACT1硫酸软骨素N-乙酰半乳糖转移酶-1种属: Dictyophora│duplicate var. northeastensis短裙竹荪东北变种

Dehydroepiandrosterone sulfate硫酸脱氢表雄酮种属: Azorhizobium caulinodansDSM5975

heparanase硫酸乙酰肝素种属: Sphingobium│sp.鞘氨醇菌属

heparanase硫酸乙酰肝素酶种属: Theileria│sergenti瑟氏泰勒虫（清水株）

Sulfotransferase硫酸转移酶种属: Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat.#树舌

thioredoxin reductase硫氧还蛋白还原酶种属: Mycena│pura (Pers.) P. Kumm.洁小菇

Thioredoxin Interacting Protein硫氧还蛋白相互作用蛋白种属: Theileria│sergenti瑟氏泰勒虫

Thioredoxin硫氧化还原蛋白种属: Nocardiopsis│sp.拟诺卡菌属菌株

Egg albumin卵白蛋白种属: Alternaria│tenuissima var. alliicola细极链格孢蒜生变种

ovarian cancer marker-CA125卵巢癌抗原种属: Agrobacterium│gelatinovorum食明胶土壤杆菌

Lecithin-Cholesterol Acyltransferase卵磷脂胆固醇酰基转移酶种属: Ganoderma│lucidum赤芝

Follistatin卵泡抑素种属: Pusillimonas│harenae沙极小单胞菌

ovalbumin specific IgE卵清蛋白特异性IgE种属: Paecilomyces│millitaris蛹草拟青霉