当前位置:上海谷研实业有限公司>>进口elisa试剂盒>>大鼠elisa试剂盒>> 48T/96T大鼠骨保护素(OPG)elisa试剂盒
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 大鼠骨保护素(OPG)elisa试剂盒 |
英文名称 | Rat Osteoprotegerin,OPG ELISA KIT |
货号 | GOY-R74243 |
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
大鼠骨保护素(OPG)elisa试剂盒操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
生长激素(GH)(酶联免疫吸附试验法) 98% 酿酒酵母 5g
生长激素(GH)(酶联免疫吸附试验法) 96% 阿达青霉 25g
糖蛋白130(gp130)(酶联免疫吸附试验法) 96% 烟曲霉 5g
肝细胞生长因子(HGF)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 成晶节杆菌 50MG
肝细胞生长因子(HGF)(酶联免疫吸附试验法) 97% 隆德假单胞菌 25g
胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)(酶联免疫吸附试验法) 97% 噬果胶黄杆菌 5g
胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)(酶联免疫吸附试验法) 98% 大肠埃希氏菌 1g
血管内皮生长因子D(VEGFD)(酶联免疫吸附试验法) 98% 鸭疫里默氏杆菌 5g
胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)(酶联免疫吸附试验法) 98% 天麻萌发菌8103号* 100g
胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)(酶联免疫吸附试验法) 98% 白地霉 25g
胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)(酶联免疫吸附试验法) 95% 卷枝毛霉灰蓝变型 100ml
血管内皮生长因子D(VEGFD)(酶联免疫吸附试验法) 95% 大肠埃希氏菌 25ml
白介素11(IL11)(酶联免疫吸附试验法) 95% 发酵乳杆菌 500ml
血管内皮生长因子C(VEGFC)(酶联免疫吸附试验法) 97% 巴西曲霉 25g
白介素12B(IL12B)(酶联免疫吸附试验法) 97% 黄色短杆菌 5g
血管内皮生长因子C(VEGFC)(酶联免疫吸附试验法) 98% 中慢生华癸根瘤菌 100mg
白介素12B(IL12B)(酶联免疫吸附试验法) 95% 孟氏假单胞菌 1g
血管内皮生长因子B(VEGFB)(酶联免疫吸附试验法) 95% 大肠埃希菌 5g
载玻片细胞P16蛋白表达荧光显微镜 GMPPA 100 ul
冰冻切片组织P16蛋白表达荧光显微镜 GMPPB 100 ul
石蜡切片组织P16蛋白表达荧光显微镜 GMPR 100 ul
载玻片细胞P16蛋白表达NBT显色光学显微镜 GMPS 100 ul
冻切片组织P16蛋白表达NBT显色光学显微镜 GNA14 100 ul
石蜡切片组织P16蛋白表达NBT显色光学显微镜 GLYAT 500 ul
细胞P16蛋白表达比色法定量 Glutamate receptor 2 100 ul
细胞P16蛋白表达荧光定量 GLRA2 100 ul
P16蛋白免疫共沉淀分析 GLRA3 100 ul
P16蛋白表达定量 GLRA1 100 ul
细胞P21蛋白表达流式细胞仪 GLRB 100 ul
载玻片细胞P21蛋白表达荧光显微镜 GLUD2 100 ul
冰冻切片组织P21蛋白表达荧光显微镜 Glutamate receptor 2 100 ul
石蜡切片组织P21蛋白表达荧光显微镜 GLYATL1 100 ul
载玻片细胞P21蛋白表达NBT显色光学显微镜 GLYCTK 100 ul
冰冻切片组织P21蛋白表达NBT显色光学显微镜 GLYR1(Glyoxylate reductase 1 homolog) 100 ul
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