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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

多巴受体D4抗体Human NIM1K (Serine/threonine-protein kinase NIM1) ELISA KIT亚铁琼脂用于肉和肉食产品中梭的计数（SN方法）

桥粒斑蛋白1抗体Human NEMF (Nuclear export mediator factor NEMF) ELISA KIT戊 烷脒加入戊烷脒多粘素琼脂

桥粒斑蛋白2抗体Human SSBP2 (Single-stranded DNA-binding protein 2) ELISA KITN-硝基-L-精

多巴受体D5抗体Human SFT2D1 (Vesicle transport protein SFT2A) ELISA KIT芦竹碱 Gramine

脱氧尿嘧三核苷水解抗体Human PGAM5 (Serine/threonine-protein phosphatase PGAM5, mitochondrial) ELISA KIT明胶琼脂糖凝胶4B

多巴受体D3抗体Human HCN4(Potassium/sodium hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 4) ELISA Kit壬酸

诱捕受体3抗体Human ATM(Serine-protein kinase ATM) ELISA Kit偏硼酸锂

多巴转运蛋白DAT抗体Human SMURF2(E3 ubiquitin-protein ligase SMURF2) ELISA Kit人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3（TRAIL-R3）ELISA试剂盒,

Bacillussubtilis二氧化锆 AR,99.0%蛋白激C抗体Bestrophin 4  卵黄状黄斑病蛋白4抗体

二氧化锆 99.99% metals basis,50nm成对螺旋细丝蛋白抗体Bestrophin 3  卵黄状黄斑病蛋白3抗体

氢氧化锆 97%炎症因子3抗体（穿透素）Bestrophin 2  卵黄状黄斑病蛋白2抗体

氧化锆,八水 99.9% metals basis山核桃素样蛋白1抗体Bestrophin  卵黄状黄斑病蛋白抗体

氧化锆,八水 98%化α型-过氧化活化增生受体抗体BEND6  BEND6蛋白抗体

锆粉 99.5% metals basis ((不包括铪)),200 目原钙粘蛋白γC5抗体BEND5  BEN结构域蛋白5抗体

甘油 Standard for GC，≥99.7% (GC) Rho鸟甘转运蛋白抗体BEND4/CCDC4  BEND4蛋白抗体

甘油 AR,99%化蛋白激C亚性抗体BEND3  BEND3蛋白抗体

甘油 CP,97%化蛋白激C亚性D型抗体BEND2/CXorf56  BEND2蛋白抗体

甘油  ≥99.5%(GC)蛋白激C亚型G抗体BECN1L1  Bcl-2同源结构域样蛋白1抗体

甘油 ACS, ≥99.5%化蛋白激C亚型G抗体BECN1/Beclin 1/ATG6  Bcl-2同源结构域蛋白抗体

甘油 色谱固定液化蛋白激C亚型G抗体BDNF  脑源神经营养因子抗体

甘油 for molecular biology, ≥99%肝再生酯1抗体Bdkrb2/B2R  缓激肽B2受体抗体

甘油 for cell culture, for insect cell culture, ≥99%(GC)酯3蛋白抗体BDKRB1  缓激肽B1受体抗体

甘油 for spectroscopy, ≥99.5%果糖-2,6-二心肌抗体BDH1  3-羟丁脱氢抗体

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。