紫色孢囊杆菌 返回列表页

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

结合转化激活因子CITED1抗体Human EPYC(Epiphycan) ELISA Kit猪胆囊收缩素/肠促胰肽（CCK）ELISA试剂盒,

Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体Human EFNA5(Ephrin A5) ELISA Kit肌酸激同工MB（CK-MB）ELISA联吸附试剂盒--专卖

CSMD2蛋白抗体Human ERα(Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit胰胨大豆胨固绿琼脂

CSMD3蛋白抗体Human EFNA4(Ephrin A4) ELISA KitV-J琼脂

钙调神经CSTP1抗体Human ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit抗 生素检定培养基7号     用钠等的效价测定

CTAGE6蛋白抗体Human EL/LIPG(Endothelial Lipase) ELISA KitL-谷盐酸盐

皮肤T瘤相关抗原4抗体Human EFNA5(Ephrin A5) ELISA KitDL-缬

膜蛋白CLDND2抗体Human ELA2B(Elastase 2B) ELISA KitN-苯甲酰-L-酪氨酰乙酯

紫色孢囊杆菌化钙 CP,98%黑色素瘤相关抗原B2抗体CDC14B  分裂周期蛋白14B抗体

钙 SU黑色素瘤相关抗原B4抗体CDC123/C10orf7  分裂周期蛋白CDC123抗体

钙 98%组蛋白乙酰转移抗体（脑膜瘤表达抗原5）CDAN1  先天性红生成异常性贫血蛋白1抗体

氢 AR,≥47.0%化微管相关蛋白4抗体CD99/E2 antigen  CD99抗体

氢 55.0 - 58.0 %黑色素瘤相关抗原B3抗体CD98  CD98重链抗原抗体

 AR,99.5%锌指蛋白801抗体CD97  CD97抗体

化锂，三水 99.9%NDUFS2抗体CD94/KLRD1  NK表面抑制性受体CD94抗体

高 ACS，99.8-100.3%NDUFAF4抗体CD93/C1qrp  CD93抗体

高钠 AR,99.5%分化相关因NDRG1抗体CD9/MRP-1  CD9蛋白抗体

高钠 CP,99.0%神经降压素抗体CD8B  CD8β链（CD8-β）抗体

钠 99%核受体辅助抑制因子2抗体CD86/B7-2  CD86抗体

9-芴酮 99%核仁蛋白抗体CD84/SLAMF5  CD84抗体

氧气 99.2%嗜中性粒胞浆因子4抗体CD83/HB15  CD83抗体

高纯氩气 99.999%化核因子NF-κB p65抗体CD83  CD83抗体

氢气氩气混合气体 H10%+Ar90%化一氧化氮合成3（内皮型）抗体CD82/KAI1  肿瘤转移抑制蛋白1抗体