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货号 | GOY-01S6461 |
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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
50管/48样 | 可见分光光度法 | GOY-01S6461 |
商品介绍
测定意义 超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。 测定原理: AP-TEMED系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗体Human RPS19(Ribosomal protein S19) ELISA Kit
白介素17受体C抗体Human RPS20 ELISA Kit
球蛋超家族成员8抗体Human RPP21 ELISA Kit松塔
白介素33抗体Human RPLP0 ELISA Kit肉桂
核蛋白9抗体(Ran结合蛋白M)Human RPP38 ELISA Kit亚钙
真核翻译起始因子3A抗体Human RPP25 ELISA Kit杂质A(2-甲基-4(5)-硝基咪唑
化真核翻译起始因子4G抗体Human RPRD1B ELISA Kit
整合素α4β7抗体Human RPL7L1 ELISA Kit双硫化物
超氧阴离子清除能力可见分光光度法氧化钙 99.99% metals basisAnti-Integrin Alpha2b/CD41/FITC 荧光素标记血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗体IgG鸡中心体蛋白110(CEP110)联免疫吸附测定试剂盒
硫化镉 CP,95%Anti-Integrin Alpha3/FITC 荧光素标记整合素α3抗体IgG鸡生长分化因子2(GDF2)联免疫吸附测定试剂盒
硫化镉 AR,98%Anti-Integrin Alpha3 Beta1/FITC 荧光素标记整合素α3β1抗体IgG鸡神经钙黏蛋白(NCAD)联免疫吸附测定试剂盒
硫化镉 99.999%Anti-Integrin a7/FITC 荧光素标记整合素α7抗体IgG鸡δ样蛋白1同源物(DLK-1)联免疫吸附测定试剂盒
化铈,无水 99.9% (REO)Anti-Integrin AlphaE2/CD103 /FITC 荧光素标记整合素αE2抗体IgG鸡干因子(SCF)联免疫吸附测定试剂盒
铜粒 99.99% metals basis,粒径<5mmanti-Integrin alpha E2 /FITC 荧光素标记整合素alpha E2 抗体IgG鸡受体(TR)联免疫吸附测定试剂盒
铜粉 99.8% metals basis,20μmAnti-Integrin AlphaM/CD11b /FITC 荧光素标记巨噬表面分子/整合素-α2抗体IgG鸡钙腔蛋白(CALU)联免疫吸附测定试剂盒
硝铯 99.99%Anti-Integrin avb3/FITC 荧光素标记整合素avb3抗体IgG鸡二肽肽IV (DPP4)联免疫吸附测定试剂盒
硝铯 AR,99.0%Anti-Integrin AlphaV Beta5/FITC 荧光素标记整合素αVβ5抗体IgG鸡超氧化物歧化1(SOD1)联免疫吸附测定试剂盒
氧化铈 99.9% metals basis,黄色Anti-Integrin Beta5/FITC 荧光素标记整合素β5抗体IgG鸡α1-B-糖蛋白(α1BG)联免疫吸附测定试剂盒
氧化铈 20nm 球形,99.5%Anti-IQGAP1/FITC 荧光素标记支架蛋白抗体IgG鸡尿嘧核苷化2(UPP2)联免疫吸附测定试剂盒
氧化铈 99.95% metals basis ,白色Anti-Phospho-IRAK1 (Ser376) /FITC 荧光素标记化白介素-1受体相关激1抗体IgG鸡胎球蛋白A(FETUA)联免疫吸附测定试剂盒
氧化铈 99.95% metals basis,<50 nm (BET)Anti-Phospho-IRAK1 (Thr209) /FITC 荧光素标记化白介素-1受体相关激1抗体IgG鸡脂A1(PLA1)联免疫吸附测定试剂盒
氧化铈 99.9% metals basis,<100 nm (BET)Anti-Phospho-IRAK1 (Thr387) /FITC 荧光素标记化白介素-1受体相关激1抗体IgG鸡抗原提呈相关转运蛋白(TAP)联免疫吸附测定试剂盒
氧化铈 99.99%Anti-IRAK 2/FITC 荧光素标记白介素-1受体相关激2抗体IgG鸡核转录因子Y亚γ(NFYC)联免疫吸附测定试剂盒
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
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